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Cytométrie en flux


Présentation

Le plateau de Cytométrie en flux est un service commun de la SF4206 ICORE accueilli au sein de l'Unité BioTICLA (UMR Inserm 1199), dans le Batiment Recherche du Centre de Lutte Contre le Cancer François Baclesse. Il est accessible à l'ensemble des équipes de la SF ICORE comme aux utilisateurs extérieurs, académiques ou privés. Ce plateau propose un certain nombre de services tel que l'aide à la mise en place des protocoles, le passage des échantillons, l'analyse et la mise en forme des résultats etc... Les analyses réalisées au sein du plateau concernent des domaines aussi variés que l'oncologie, la biologie marine, les neurosciences ou la microbiologie par exemple.

Expertise

Services proposés :
  • Conseils sur l’élaboration des protocoles pré-analytiques
  • Conception des protocoles d’analyses sur les cytomètres
  • Passage des échantillons proprement dits
  • Aide à l’exploitation des résultats
  • Formation à l’utilisation des cytomètres (sur demande des équipes de Recherche)

Domaines concernés : la cancérologie, la biologie marine, la toxicologie, les neurosciences ou la microbiologie par exemple.
 

Exemples d’applications :

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Analyse morphologique des cellules (taille et structure)
1 Analyse morphologique des cellules (taille et structure)

Analyse morphologique des cellules (taille et structure)

2 Analyse de la répartition dans le cycle cellulaire

Analyse de la répartition dans le cycle cellulaire

Analyse de la répartition dans le cycle cellulaire2
3 Analyse de la répartition dans le cycle cellulaire2

Analyse de la répartition dans le cycle cellulaire2

Analyse de la réplication de l’ADN
4 Analyse de la réplication de l’ADN

Analyse de la réplication de l’ADN

Étude de la ploïdie
5 Étude de la ploïdie

Étude de la ploïdie

Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)
6 Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)

Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)

Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)
7 Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)

Quantification de la viabilité et/ou mort cellulaire (Annexine V –IP ; APO2.7…)

Analyses immunologiques
8 Analyses immunologiques

Analyses immunologiques

Analyses immunologiques
9 Analyses immunologiques

Analyses immunologiques

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Étude de la prolifération cellulaire (nombre de génération)
9a Étude de la prolifération cellulaire (nombre de génération)

Étude de la prolifération cellulaire (nombre de génération)

Mise en évidence du transfert de gènes et de siRNA Analyse de l’activité des mitochondries Analyse du taux d'infection virale Phénomène de phagocytose (avec des billes fluorescentes) Dosage des radicaux libres (ROS)

Prolifération des populations d'algues dans des échantillons d'eau de mer
9b Prolifération des populations d'algues dans des échantillons d'eau de mer

Prolifération des populations d'algues dans des échantillons d'eau de mer

Identification et quantification de cytokines
9c Identification et quantification de cytokines

Identification et quantification de cytokines

Identification et quantification de cytokines
9d Identification et quantification de cytokines

Identification et quantification de cytokines

Identification et quantification de cytokines
9e Identification et quantification de cytokines

Identification et quantification de cytokines

Analyse de microparticules
9f Analyse de microparticules

Analyse de microparticules

Parasitologie
9g Parasitologie

Parasitologie

  

Mots-clés

  • Cytométrie en flux
  • Fluorescence

Équipements :

Gallios Beckman Coulter : équipé de 3 lasers (Bleu: 488 nm; Rouge: 633 nm et Violet: 405 nm); carrousel de 32 tubes; détection de la taille FS (selon 3 angles possibles: 0.4 à 40 µm), de la granulosité SS et jusqu'à 10 fluorescences simultanément (FL1 à 5 pour le laser Bleu, FL6 à 8 pour le laser Rouge, FL9 et 10 pour le laser Violet), analyse sur 4 décades des signaux
CytoFlex Beckman Coulter : équipé de 4 lasers (Bleu : 488 nm ; Jaune : 561 nm ; Violet : 405 nm et le Near UV : 375 nm) ; détection de la taille FS, de la granulosité SS ;  analyse sur 7 décades des signaux, mesure directe en valeur absolue (volume prélevé connu)
Analyse de 12 fluorescences simultanément (2 sur le Bleu, 4 sur le Jaune, 4 sur le Violet et 2 sur le Near UV), configuration modulable des filtres ; analyse des microparticules (granulosité VSSC sur le violet ; à partir de 100 nm)

Logiciels à disposition :
Kaluza et Cytexpert : Logiciel de ré-analyse en temps réel des données de cytométrie en flux
FCS 6 Express : logiciel de ré-analyse des données en cytométrie de flux avec analyse des subdivisions cellulaires et de la répartition des populations dans le cycle cellulaire.

Personnel


Laurent POULAINLaurent POULAIN
Responsable
02 31 45 52 05
l.poulain@baclesse.unicancer.fr

Marilyne GUILLAMINMarilyne GUILLAMIN
Personnel technique
02 31 45 52 11
m.guillamin@baclesse.unicancer.fr

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Dernière modification : 29 mars 2019


CONTACT

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Plateau de cytométrie en flux
Centre F Baclesse · Bâtiment Recherche
Avenue du Général Harris
14000 CAEN

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